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医学生物学实验教程(第2版)

医学生物学实验教程(第2版)

作者:刘华
出版社:北京大学医学出版社出版时间:2022-08-01
开本: 16开 页数: 216
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医学生物学实验教程(第2版) 版权信息

医学生物学实验教程(第2版) 内容简介

本书为首都医科大学校本实验课程教材,在新版教材的编写中,始终强调将对基本理论、基本知识、基本技能的学习放在首位。因此,在篇章的安排上,**篇“医学生物学实验基本技术及原理”和第二篇“基本性实验”重在打基础,主要安排基础性的经典验证性实验,培养学生掌握扎实的基本理论知识和实践技能。同时也继承了原教材多学科整合的特色,从细胞、亚细胞和分子水平三个层次上介绍医学生物学实验的基本方法和实验技术,为培养学生跨学科运用所学知识的能力打下坚实的基础。第三篇“设计性实验”着力培养学生的自主学习能力和科学思维能力,项目设计注重调动并充分发挥学生的主观能动性。第四篇“研究创新性实验”旨在培养学生的科研创新能力,满足培养具有创新意识和创新能力的高素质医学人才的需要。

医学生物学实验教程(第2版) 目录

目录
**篇?? 医学生物学实验的基本技术及其原理 1
**章?? 绪论 2
**节?? 医学生物学实验课程的学习目的和要求 2
一、学习目的 2
二、学习要求 2
第二节?? 实验报告的撰写 3
一、实验报告的基本要求 3
二、实验报告的基本内容 3
三、实验结果 3
四、分析与讨论 4
第三节?? 实验室规章制度 4
一、实验室安全与防护 4
二、仪器保管及清洁 4
三、试剂使用规则 4
四、废弃物处理 5
五、实验室清洁 5
第二章?? 医学生物学实验常用仪器设备和实验方法 6
**节?? 生物化学与分子生物学实验常用仪器设备与基本操作 6
一、常用仪器设备 6
二、基本操作 6
三、实验样品的制备 8
第二节?? 生物化学常用实验方法及基本原理 9
一、分光光度法 9
二、层析法 10
三、电泳法 11
四、离心分离技术 13
第三节?? 分子生物学常用实验方法及基本原理 14
一、PCR 技术 14
二、印迹技术 15
三、核酸分子杂交技术 17
四、重组 DNA 技术 17
第四节?? 细胞生物学与遗传学实验常用仪器和基本操作 21
一、显微镜的结构和使用 21
二、细胞培养室的设置要求、仪器设备和无菌操作技术 26
三、细胞培养用液的配制与消毒 29
四、器皿的清洗和消毒 33
第五节?? 细胞生物学常用实验方法及基本原理 35
一、细胞形态结构的观察方法 35
二、细胞组分的分析方法 38
三、流式细胞分析技术 38
四、细胞培养技术 39
第六节?? 医学遗传学常用实验方法及基本原理 39
一、染色体的制备与分析技术 39
二、人类遗传病的分子生物学诊断技术 40
第七节?? 组学研究技术及医学生物信息学分析 41
一、组学研究技术 41
二、医学生物信息学分析 46
第二篇?? 基本性实验 51
第三章?? 细胞形态与功能和亚细胞组分观察分析 52
**节?? 细胞培养的基本方法 52
一、细胞的原代培养 52
????实验 1 鸡胚成纤维细胞的原代细胞培养 53
????实验 2 小鼠骨髓基质细胞的体外原代培养 55
二、细胞的传代培养 56
????实验 1 贴壁细胞的传代培养 57
????实验 2 悬浮细胞的传代培养 58
三、培养细胞的增殖能力测定 59
????实验 体外培养细胞的计数与细胞活性鉴别 59
第二节?? 细胞和亚细胞组分观察分析及细胞功能测定的实验方法 61
一、细胞形态和细胞分裂的观察 61
????实验 1 细胞标本的制备与形态观察 61
????实验 2 细胞有丝分裂的观察 62
二、亚细胞组分的分离及观察鉴定方法 64
????实验 亚细胞组分的分离及观察鉴定 64
三、应用荧光染色法观察分析亚细胞组分 66
实验 1 荧光染色法显示培养细胞的内质网分布 66
实验 2 荧光染色法显示培养细胞的骨架 - 微丝 67
实验 3 荧光染色法显示体外培养细胞内的线粒体分布 68
四、细胞功能测定观察分析的实验方法 69
实验 1 细胞增殖的测定 70
实验 2 Ho.33342 与碘化丙啶荧光双染显示凋亡与坏死细胞 71
实验 3 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的观察 72
第四章?? 生物分子分析实验方法 74
**节?? 生物分子在细胞内定位与分布的分析方法 74
一、核酸在细胞内的分布 74
实验 DNA 特异显示法定性分析核酸在细胞内的分布 74
二、酶和蛋白质在细胞内的定位 77
实验 1 乳酸脱氢酶在细胞内定位的分析 77
实验 2 碱性和酸性蛋白质在细胞内定位的分析 78
三、糖和脂类在细胞内的分布 79
实验 1 过碘酸希夫反应定性分析糖原在细胞内的分布 79
实验 2 苏丹黑染色法定性分析脂类在细胞内的分布 80
第二节?? 蛋白质的分析实验方法 81
一、蛋白质性质的分析 81
实验 1 蛋白质的两性解离和等电点测定 81
实验 2 蛋白质的变性和沉淀反应 82
二、蛋白质含量的测定 85
实验 1 蛋白质含量的 Folin- 酚法测定 85
实验 2 紫外光吸收法测定蛋白质浓度 86
三、蛋白质和氨基酸的分离、提取、纯化和鉴定 88
实验 1 离子交换柱层析法分离混合氨基酸 88
实验 2 醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白质 89
实验 3 血清γ球蛋白的初步分离提取 91
实验 4 血清 γ 球蛋白的精细分离与纯度鉴定 93
第三节?? 核酸的分析实验方法 98
实验 紫外分光光度法测定核酸的浓度与纯度 98
第四节?? 酶的分析实验方法 99
一、酶反应条件的选择 99
实验 酶促反应的影响因素 99
二、酶促反应动力学研究 101
实验 碱性磷酸酶的 K m 值测定 101
三、酶的分离提取及活性测定 104
实验 碱性磷酸酶的分离提取和比活性测定 104
第五章?? 分子生物学实验方法 108
**节?? DNA 的制备与分析方法 108
一、DNA 的制备 108
实验 1 组织 DNA 的分离、提取和纯化 108
实验 2 培养细胞 DNA 的分离提取 109
二、DNA 的分析 111
实验 1 琼脂糖凝胶电泳法分离 DNA 片段 111
实验 2 核酸分子探针标记与杂交实验 113
第二节?? 基因表达分析方法 118
一、RNA 的制备 118
实验 动物组织总 RNA 的提取和纯化 118
二、在 mRNA 和蛋白质水平分析基因表达的方法 120
实验 1 RT-PCR 法检测基因的表达 120
实验 2 蛋白质印迹法 121
第三节?? 基因工程技术 123
一、载体 DNA 的制备与鉴定 123
实验 质粒 DNA 的快速分离提取和酶切与鉴定 123
二、基因组 DNA 分离提取及目的基因扩增与鉴定 127
实验 小鼠肝组织基因组 DNA 的分离提取及 p53 基因的扩增与鉴定 127
三、重组 DNA 分子的构建、导入和筛选 131
实验 1 目的基因的纯化与回收和重组 DNA 的构建 131
实验 2 重组 DNA 的导入和筛选 133
第六章?? 生物学实验技术在医学研究中的应用 136
**节?? 临床疾病与生物化学特定物质的测定 136
一、高脂血症与血清脂类分析测定 136
实验 血清甘油三酯、总胆固醇和 HDL- 胆固醇的定量测定 136
二、糖尿病与血糖浓度分析测定 141
实验 血糖浓度的定量测定 142
三、肝疾病与血清酶活性的分析测定 145
实验 血清谷丙转氨酶活性测定 145
四、肾功能异常与血清尿素氮的分析测定 147
实验 血清尿素氮含量的测定 147
第二节?? 染色体标本制备与核型分析 149
一、正常和异常染色体的识别与鉴定 149
实验 1 小鼠骨髓细胞染色体标本的制备与观察 149
实验 2 人体外周血淋巴细胞培养及染色体标本的制备 151
实验 3 人类染色体显带技术 153
实验 4 正常人类染色体核型分析及人类异常染色体的识别 154
二、环境诱发染色体畸变的检测 159
实验 小鼠骨髓细胞微核检测技术 159
第三节?? 单核苷酸多态性及分子遗传标记的应用 161
实验 1 乙醛脱氢酶多态性位点 rs671 基因分型及其群体遗传学数据分析 161
实验 2 分子遗传标记微卫星 DNA 在个体识别中的应用 163
第四节?? 生物学实验技术在肿瘤研究中的应用 166
一、肿瘤细胞的集落培养与细胞中物质的测定 166
实验 肿瘤细胞集落形成率和细胞中总蛋白质含量的测定 166
二、基因检测技术在临床肿瘤诊断治疗中的应用 169
实验 ARMS-PCR 法检测肿瘤基因突变 170
三、肿瘤细胞的异常染色体识别与检测 172
实验 肿瘤细胞染色体荧光原位杂交技术 172
第三篇?? 设计性实验175
第七章?? 实验的设计与实施 176
实验 1 一种酶的分离、纯化与鉴定 176
实验 2 缺氧导致的动物脑组织生物化学异常改变 176
实验 3 化学物质对细胞的作用 179
实验 4 细胞膜性成分的形态及分布依赖于细胞骨架的实验验证 179
实验 5 基因表达影响肿瘤细胞表型变化的检测分析 180
第四篇?? 研究创新性实验181
第八章?? 蛋白质功能研究常用技术 183
**节?? 细胞蛋白质的含量测定 183
实验 蛋白质含量的 BCA 法测定 183
第二节?? 蛋白质 - 蛋白质相互作用研究技术 184
实验 免疫共沉淀 184
第三节?? 蛋白质 - 核酸相互作用研究技术 187
实验 1 电泳迁移阻滞实验 187
实验 2 染色质免疫沉淀 191
第九章?? 基因功能研究技术 193
实验 1 真核细胞基因的过表达 193
实验 2 应用小干扰 RNA 抑制基因表达 194
实验 3 实时荧光定量 PCR 检测基因的表达 196
附录199
中英文专业词汇索引201
主要参考文献204

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